HyPURITY色谱柱的使用寿命和以下因素有关
更新时间:2018-11-08 点击次数:1854
HyPURITY色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,主要的是与日常的维护密切相关。HyPURITY色谱柱的使用寿命主要是柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支HyPURITY色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该HyPURITY色谱柱已经结束。因此,延长HyPURITY色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。以下是HyPURITY色谱柱的日常维护方法:
一、流动相的PH应在使用的范围内
流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,使用寿命变短。由于流动相的PH控制不当而对HyPURITY色谱柱造成的损害,通常很难是HyPURITY色谱柱恢复,因此必须认真对待,严格控制流动相的PH值。
二、去除样品和流动相中的固体颗粒
样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞HyPURITY色谱柱筛板,筛板被堵住不仅会引起柱压的升高,而且也会引起柱效下降,因为筛板的堵塞会引起液流不均,导致色谱峰型拖尾、变宽,从而使柱效下降。因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析样品前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45μm滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器
样品和流动相经过滤后并不能*消除固体颗粒物质,因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质,这些固体颗粒被流动相带入HyPURITY色谱柱,堵塞筛板,导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与HyPURITY色谱柱孔径相同,因此可以阻止固体颗粒物质到达HyPURITY色谱柱,有效防止HyPURITY色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大比例,因此,除对样品和流动相进行过滤外,建议您在HyPURITY色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
如果HyPURITY色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的,可选择以下方式进行补救:
1.先在HyPURITY色谱柱前加上保护柱或在线过滤器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲HyPURITY色谱柱180min.
2.先在HyPURITY色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器,然后反向使用。
四、正确使用缓冲盐
缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展,使HyPURITY色谱柱的保留能力下降,柱效降低。缓冲盐析出后,去除非常困难,因此,正确的使用缓冲盐对延长HyPURITY色谱柱使用寿命非常重要。
正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出,因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话:使用前要过滤,使用后要冲洗。
五、防止强保留物质在HyPURITY色谱柱上存留
强保留物质和大分子化合物在HyPURITY色谱柱中累积,对样品中的化合物产生额外的保留行为,不仅引起峰型变宽、拖尾,使柱效下降,同时也会引起保留时间的变化,累积到一定程度时还会导致柱压升高。由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应,需要一定的时间才会体现出来,但对许多药品特别是复杂样品而言,很难判断其是否是含有强保留物质,因此要防止强保留物质的累积,需要在每天的日常维护中用纯甲醇或乙氰清洗HyPURITY色谱柱。