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Sephadex凝胶色谱柱使用及再生

更新时间:2022-03-03      点击次数:3317

你知道凝胶色谱柱如何使用还有保存吗?如果在使用过程中不清楚这些操作的话,可能会导致你的色谱柱损毁的哦!

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 色谱柱介绍

凝胶色谱柱是头孢系列药物聚合物专用色谱柱,它采用符合中国药典2020版中头孢类药物聚合物的测试条件设计制作,进口葡聚糖凝胶Sephadex G-10装填,适用于药典中规定的多种抗生素聚合物的分析。

 凝胶色谱柱的使用

1. 为避免管路中的气泡和有机溶剂被带入凝胶柱中,开启色谱泵,要用蒸馏水清洗整个色谱系统,然后再接凝胶色谱柱。

重点切记:不要让有机溶剂进入柱中。这样会让柱子中的凝胶脱水,会导致柱床损毁。

 

2. 使用过程不要使流速骤然加大,以防止压力迅猛升高而导致柱床损毁,使柱效迅速降低。

凝胶色谱柱的保存

使用完凝胶柱之后,务*蒸馏水将盐流动相从色谱柱中替换掉之后,再将含有抑菌剂的蒸馏水充入凝胶柱中,然后再将凝胶柱两端封闭后,储存在5℃的冰箱中。

如果第二天还要使用,也务必从系统中取下凝胶柱,将凝胶柱两端封闭后放置。 

凝胶色谱柱的再生

由于高分子杂质含量较低,一般含量方法中均采用高难度大体积进行来提高检测能力,多次进样后,样品可能在色谱柱中发生严重的非特异性吸附,可能改变凝胶色谱柱的分离机制,另一方面有可能造成色谱柱的堵塞,使得柱压升高。所以要对凝胶进行恢复处理,方法可以使用:0.5mol/L NaOH和0.5mol/L NaCl的混合溶液30-60倍柱体积冲洗凝胶柱,再用蒸馏水冲洗至中性。

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