液相色谱柱作为高效液相色谱分析的核心部件，其养护直接关系到分离效果、数据准确性及使用寿命。以下是从使用规范、清洁维护、存储管理到预防性维护的全方面养护细节：
一、日常使用规范
- 流动相选择与预处理
- 纯度要求：必须使用HPLC级溶剂，避免杂质沉积堵塞柱头。
- pH控制：反相柱适用pH 2-8范围，超出可能导致硅胶骨架溶解；对于特殊pH条件,应选用杂化颗粒柱。
- 缓冲盐浓度：常用磷酸盐缓冲液浓度不超过50mmol/L，高离子强度易析出结晶损伤填料，实验结束后需用纯水过渡至少30分钟。
- 样品预处理与进样
- 清洁进样：样品需经0.22μm滤膜过滤或高速离心去除颗粒物，避免堵塞柱头。
- 溶解介质：优先用流动相溶解样品，减少溶剂极性差异对填料的冲击。
- 系统平衡与压力监测
- 梯度洗脱预平衡：新柱或长时间未用的色谱柱,需用初始比例流动相以低流速(0.2mL/min)冲洗2小时以上,使固定相充分润湿。
- 压力异常处理：正常压力波动应在±5%范围内,若出现突升超过30%,提示筛板堵塞或填料塌陷,需立即停机检查。
二、深度清洁与再生技术
- 常规冲洗与正向冲洗
- 断开检测器连接,改用异丙醇:水=1:1混合液,以1mL/min流速反向冲洗30分钟,随后切换至纯有机相运行1小时，此法可清除90%以上的极性污染物。
- 蛋白质残留推荐使用含0.1%TFA的6M尿素溶液冲洗;脂类物质采用正己烷:异丙醇=1:1体系超声处理15分钟。
- 原位再生与特殊清洗
- 酸碱交替法：针对顽固吸附物,依次注入0.1mol/L NaOH→0.1mol/L HCl→水洗各20mL,注意每次切换后需用中性流动相过渡，适用于聚合物基质柱。
- 超临界流体清洗：CO₂流体在40℃、300bar条件下可有效去除非极性杂质,尤其适合半制备型大孔径柱(≥100Å)。
三、存储与运输管理
- 短期存放(1个月)
- 惰性气体保护：充入氮气置换内部氧气,抑制微生物滋生，可将色谱柱置于含有干燥剂的密封容器内。
- 温度控制：最佳存储温度为15-25℃,避免阳光直射，低温环境(4℃)下需提前恢复至室温后再启用。
- 长期保存
- 反相柱存于纯甲醇或乙腈中，正相柱存于脱水正己烷中，离子交换柱存于含防腐剂的水中，拧紧堵头避光保存。
四、预防性维护策略
- 定期性能监测
- 每季度进行苯甲酸钠标品测试，当理论塔板数下降至初始值70%时判定寿命终结。
- 记录使用次数、压力变化及维修历史，建立维护日志。
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